Toksičnost fungicida različitog mehanizma delovanja prema izolatima Didymella pinodella poreklom sa graška

Abstract

Didymella pinodella – prozrokovač crne pegavosti graška je najrazornija bolest graška širom sveta koja, u zavisnosti od uslova sredine i kvaliteta graška, može usloviti gubitke prinosa od 28 do 88%. U ovom radu, u in vitro uslovima, ispitan je uticaj fungicida različitog mehanizma delovanja na izolate D. pinodella poreklom sa graška. Izolati D. pinodella korišćeni u ispitivanjima, poreklom su sa lista i mahuna graška, kolekcionisani tokom 2023 godine iz lokaliteta Trbušac i Skupljen (okolina Šapca) i deo su kolekcije fitopatogenih gljiva Instituta za zaštitu bilja i životnu sredinu (Beograd). Ispitivana je osetljivost gljive prema četiri kombinacije komercijalnih fungicida: ciprodinil + fludioksonil, fluksapiroksad + difenokonazol, azoksistrobin + difenokonazol i difenokonazol a kao standard je korišćen azoksistrobin. Primenjeni su fungicidi u početnoj preporučenoj koncentraciji primene: ciprodinil + fludioksonil (25μg/10ml vode), fluksapiroksad + difenokonazol (100μl/10ml vode), azoksistrobin + difenokonazol (50μl/10ml vode), difenokonazol (25μl/10ml vode) i azoksistrobin (50μl/10ml vode). Za ispitivanje antifungalne aktivnosti fungicida korišćena je mikrodiluciona metoda na miktrotitarskim pločama. Određivanje minimalnih inhibitornih koncentracija (MIC) vršeno je pomoću skale razređenja primenjenih fungicida od 10-1 do 10-9 u krompir dekstroznom tečnom medijumu u četiri ponavljanja. Na kraju je dodavano 10 μl suspenzije micelije u tečni medijum finalne zapremine od 100 μl. Mikrotitarske pločice inkubirane su u termostatu na 25°C u trajanju od 14 dana. Najniža koncentracija na kojoj nije bilo rasta micelije uzimana je za minimalnu inhibitornu koncentraciju (MIC). Najviši stepen tokstičnosti ispoljila je kombinacija azoksistrobina i difenokonazola, sa prosečnom vrednosti minimalne koncentracije inhibicije od 0,003 μl/ml; zatim kombinacija ciprodinila i fludioksonila - MIC 0,02 μg/ml; kombinacija fluksapiroksada i difenokonazola - MIC 0,08 μl/ml, dok je najnižu toksičnost ispoljio difenokonazol - MIC 0,2 μl/ml.